帝王蝶是世界上唯一能长距离迁徙的蝴蝶，其幼虫只摄食一种叫乳草的植物，乳草会分泌一种名为强心甾的毒素，有资料研究显示，过量摄入强心甾对除帝王蝶幼虫以外其他的动物来说都是有毒的，会导致死亡。
（1）钠钾泵在许多动物细胞膜上均有存在，它能通过主动转运控制细胞内外的钠、钾离子浓度，因此从膜蛋白功能的角度看，钠钾泵还具有_____的活性。强心甾能与细胞膜表面的纳钾泵结合，抑制其主动转运功能，从而导致细胞内外________________失衡，使细胞破裂。
（2）科学家猜测：帝王蝶的钠钾泵基因可能发生了突变，使其获得了对强心甾的抗性。为研究帝王蝶钠钾泵基因的碱基排列顺序并获得相应的蛋白产物，科学家尝试从帝王蝶基因组中获取该基因，并通过________ 实现了对其的扩增；科学家选用合适的__________、DNA 连接酶和载体构建重组 DNA 分子，并将其导入大肠杆菌以获得大量的目的基因，再将其导入_______________ 中（
| A．农杆菌 | B．酵母细胞 | C．昆虫细胞 | D．海拉细胞）获得相应的蛋白产物。 |
（3）为提高重组 DNA 分子导入的成功率，除了需要确保重组 DNA 分子有足够的物质的量外，还必须采用各种方法提高大肠杆菌的_________。为了筛选成功导入重组 DNA 分子的大肠杆菌，宜用__________法将转化混合物转移至含有________的平板上。通过基因测序，发现帝王蝶钠钾泵基因中的突变会导致其蛋白产物中有 3 处氨基酸种类与其他昆虫不同，分别是第 111、119 和 122 位氨基酸，这体现了基因突变的普遍性。
（4）为了从受体细胞中分离目的基因的蛋白产物（目的蛋白），科学家在目的蛋白的肽链末端添加一个含有 6-10 个组氨酸的“标签”，该标签在适宜条件下可以与含有金属离子的固定化介质结合。因此，可以提取受体细胞的______中的全部蛋白质，通过_____法将其中的目的蛋白固定在层析柱上，再洗去不需要的杂蛋白，最后将目的蛋白从层析柱上______下来，从而获得纯度较高的目的蛋白。通过对目的蛋白的研究发现：上述 3 个位点的突变使得帝王蝶膜结构上钠钾泵的____发生了改变，强心甾无法与其结合，由此验证了之前的猜测。
（5）为进一步研究上述突变位点的作用，科学家使用 CRISPR/Cas9 技术在果蝇中开展了相关研究。
通过该技术，研究人员可以在 DNA 分子中特定的序列处剪切 DNA 分子并进行编辑。研究人员将基因编辑所需的各种元件同时导入果蝇____细胞中，对钠钾泵基因上的相应位点进行编辑，实验结果如下：
突变情况
| 神经系统功能
| 强心甾抗性
|
无突变
| +++
| -
|
111
| +
| +
|
119
| +++
| -
|
122
| --
| ++
|
111+119
| ++
| ++
|
122+119
| +
| +++
|
111+119+122
| ++
| ++++
|
注：“+”表示神经系统功能正常或有强心甾抗性“-”表示神经系统功能不正常或没有强心甾抗性
根据上表分析，可以推断出：_____突变对果蝇正常生存影响最小，__________突变则可能是在帝王蝶进化过程中最后出现的，3 个位置先后出现的突变使得帝王蝶在保证神经系统正常功能的前提下，还进一步获得了对强心甾的抗性，这体现了进化论中________的思想。
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