(1)利用如图载体构建A基因中有LoxP序列的小鼠。图中载体与A基因颜色相同的区域序列相同。通过同源臂使载体与A基因上的对应相同序列发生片段互换,将LoxP整合到A基因上得到A′基因,A′基因与A基因功能相同。
(2)来自于噬菌体的Cre酶可将它所在细胞中含LoxP序列的基因敲除。研究人员将Cre酶基因与特异性启动子拼接,使其仅在小鼠胰腺细胞中表达。胰腺细胞特异表达Cre酶的小鼠称为C鼠。
以下是利用AA′杂合鼠和C鼠杂交获得A基因胰腺特异性敲除鼠的操作过程,并利用小鼠尾部细胞检测杂交后代基因型。(注:A和Cre酶基因位于小鼠的不同染色体上)
①第一批杂交:AA′鼠分别与AA′鼠、C鼠杂交,在子一代中筛选,获得两类鼠:A′A′鼠和
②第二批杂交:将第一批杂交筛选获得的两类鼠进行一次杂交,获得多只小鼠,其中含有A基因胰腺特异性敲除小鼠。利用PCR的方法检测这些小鼠尾部细胞的基因型,引物(P1~P6)及产物电泳结果如下图所示。
(3)将纯合A′A′鼠(无Cre酶)与第二批杂交筛选得到的A基因胰腺特异性敲除的小鼠进行杂交,出生的后代有、无Cre酶的小鼠数量之比接近

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y = sin x, x∈R, y∈[–1,1],周期为2π,函数图像以 x = (π/2) + kπ 为对称轴
y = arcsin x, x∈[–1,1], y∈[–π/2,π/2]
sin x = 0 ←→ arcsin x = 0
sin x = 1/2 ←→ arcsin x = π/6
sin x = √2/2 ←→ arcsin x = π/4
sin x = 1 ←→ arcsin x = π/2


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