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科学家最初从多管水母属中分离出的绿色荧光蛋白（GFP）基因，现已广泛用于基因工程中载体上的标记基因。烟草花叶病毒（TMV）是造成烟草产量损失的主要病毒。某科研团队设计了利用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）快速筛选表达TMV外壳蛋白基因（CP）的转基因烟草品系（该品系能抑制病毒的复制，从而显著延缓病毒感染的发生），设计过程如下图。回答下列问题：
   
(1)获取外源基因：
①为了获得TMV的外壳蛋白基因（CP），先要分离得到TMV的外壳蛋白，分析该蛋白质的氨基酸序列和相应的核苷酸序列，再利用___法获得该外源基因。
②野生型GFP是由238个氨基酸组成的单体蛋白，首先需要在___中检索获取GFP基因的编码序列，并采用___工程中结合PCR的定点突变等技术，设计和改造GFP中第64、65号2个氨基酸后，成为EGFP使其荧光强度提高35倍。对于该基因的检测，通常需进一步通过___鉴定，不采用琼脂糖凝胶电泳原因是___。
③用一定的方法将CP基因和EGFP基因连接获得CP-EGFP融合基因。
(2)利用表达载体构建重组DNA分子：用不同的限制性内切核酸酶对含CP-EGFP融合基因的DNA片段和表达载体Ti质粒进行处理，使它们的两端各自形成不同的黏性末端，从而避免___。然后用DNA连接酶将CP-EGFP融合基因和Ti质粒连接形成重组Ti质粒，其中CP-EGFP融合基因插入质粒的___中。
(3)重组DNA分子转化受体细胞（根癌农杆菌和烟草叶片细胞）：
①先将根癌农杆菌放于低温、低浓度的CaCl₂溶液中，造成细胞膨胀，___改变，成为感受态细胞。再在低温条件下将根癌农杆菌与重组Ti质粒混合培养在___培养基中，最后进行短暂的热刺激处理，使CP-EGFP融合基因转入根癌农杆菌细胞。
②用筛选、鉴定后的重组根癌农杆菌去侵染消毒后的离体烟草叶片时，___的叶片会产生酚类化合物，诱导根癌农杆菌质粒上vir系列基因表达形成特异性内切酶和DNA聚合酶等，进而从质粒上___出特定DNA片段并整合到烟草叶肉细胞的染色体上。转化完成后需及时用___的抗生素进行脱菌操作。
(4)检测目的基因及其表达产物：将处理后的烟草叶片在相应的MS培养基上培养成试管苗，该培养基一般不添加葡萄糖而是添加蔗糖，其原因有：相同物质的量浓度下蔗糖比葡萄糖提供更多的能量，还有___（写出1点）。为检验CP基因是否转入并成功表达，可直接检测组培苗烟草叶片细胞中是否具有___的特征，省去了分子水平的检测步骤，大大降低了工作量。
(5)为什么转入CP基因（非抗性基因）的烟草植株具有对抗TMV的感染能力？科研团队的研究结果表明：CP基因转录的RNA以反义方式作用于病毒的___，或同模板竞争复制酶而干扰病毒的复制，并且抗性过程需要外壳蛋白的直接参与。