学进去-教育应平等而普惠
试题
类型:非选择题
难度系数:0.40
所属科目:高中生物
金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于动物肝脏细胞中的金属结合蛋白,具有吸附重金属的作用。科研人员将MT基因导入大肠杆菌构建工程菌,利用这一工程菌吸附工业废水中的重金属。回答下列问题:
(1)为获取目的基因,从____________中提取mRNA,通过___________法获得MTcDNA。MTcDNA的碱基序列与细胞中MT基因的碱基序列___________(填“相同”或“不同”)。
(2)为了提高工程菌MT蛋白的产量,将MT基因与外源表达增强元件连接(图甲表示引物对应的位置)。利用PCR检测连接是否成功,可选择的引物组合是___________(填字母).

A.①+③                    B.①+④                    C.③+④
该PCR反应体系中需加入_____________酶。
(3)将改造后的目的基因进行PCR扩增,得到的片段末端为平末端,而载体E只有能产生黏性末端的酶切位点。为了能够将MT基因与载体E相连,可以在上述引物的______________(填“5’”或“3’”)端添加能产生黏性末端的限制酶识别序列;也可以借助中间载体P将MT基因接入载体E。(图乙表示载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列)

后者具体操作步骤如下:
①选用______________酶将载体P切开,再用DNA连接酶将MT基因与载体P相连,构成重组载体P'。
②载体P'不具有表达MT基因的______________________________。选用______________酶组合对载体P'和载体E进行酶切,将切下的MT基因和载体E用DNA连接酶进行连接。为了提高获得重组质粒的效率,除了考虑适宜的外界条件、目的基因的浓度外,还需考虑_____________(写出两点)
(4)将重组质粒导入到用_____________处理的大肠杆菌中完成转化;利用含有_____________的培养基筛选出MT工程菌。
(5)通过检测发现MT基因已经成功导入大肠杆菌,但该菌不能吸附工业废水中的重金属,可能的原因是:____________
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sin x = 1 ←→ arcsin x = π/2

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2019-09-19

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