学进去

白细胞表面抗原2（SLA-2）在抗原呈递、机体器官移植以及免疫应答方面有着重要作用。为进一步研究SLA-2的结构与功能，科研人员以能稳定传代的猪肾上皮细胞为材料，构建了稳定高表达SLA-2基因的细胞株，过程如下图。其中，Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Puro^r为嘌呤霉素抗性基因，BclI、NotI、XbaI、San3AI为限制酶酶切位点，括号内数值表示距复制原点的长度。请回答下列问题。

限制酶	BclⅠ	NotⅠ	XbaⅠ	San3AⅠ
识别序列及切割位点	T↓GATCA	GC↓GGCCGC	T↓CTAGA	↓GATC

(1)过程①需要的酶有_________与细胞内基因相比，过程①获得的SLA-2基因在结构上不具有_________。为使获得的SLA-2基因与质粒1定向连接，扩增时应选用的1对引物为_________。
a．5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3'
b．5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC-3
c．5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3'
d．5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC-3'
(2)过程②为酶切、连接后的重组质粒转化处于___________的大肠杆菌，转化后采用含_________的平板筛选。筛选获得的大肠杆菌需扩大培养，其目的是__________。
(3)过程⑤需将SLA-2基因插入启动子与终止子之间，目的是___________。为鉴定与验证重组质粒3，研究人员用NotI和Sar3AI完全酶切质粒2和重组质粒3后电泳并比较。请在答题纸相应位置画当可能得到的电泳条带。__________
(4)研究中，一般利用最小致死浓度（使某种细胞全部死亡的最小浓度）的嘌呤霉素溶液浸染细胞以筛选出转化的猪肾上皮细胞。为确定最小致死浓度，科研人员利用未转化的猪肾上皮细胞进行了相关实验．结果如下图。根据结果，应使用浓度为___________的嘌呤霉素溶液浸染，理由是__________。