学进去

为培育香型抗稻瘟病水稻，研究者利用 CRISPR-Cas9 基因编辑技术（机理如图1），将含有Cas9和gRNA基因的表达载体（如图2）导入水稻，定向敲除香味抑制基因Badh2、感稻瘟病基因Pi21。




(1)CRISPR-Cas9系统能精准敲除靶基因，其作用机理是gRNA与靶基因进行____；Cas9蛋白可催化____（填化学键名称）水解，剪切特定DNA片段，被切割的DNA修复时会引起____（变异类型），导致基因失活。
(2)研究者用农杆菌转化法将CRISPR-Cas9表达载体导入水稻愈伤组织。为筛选成功导入表达载体的水稻愈伤组织，培养基中需加入____。
(3)为研究水稻的靶点突变情况，提取____，并设计____，进行PCR扩增并测序分析，获得Pi21-Badh2双基因突变杂合株系。
(4)将Pi21-Badh2双基因突变杂合株系____，以获得不含转基因成分（无T-DNA）的纯合突变植株。
①子代中，Pi21-Badh2双基因突变纯合子的概率为1/16，则两基因的位置关系为：____。
②对纯合突变植株利用Cas9的引物进行扩增，结果如下图，应选取植株____对突变基因做进一步的功能鉴定。从生物安全的角度，阐明选择的理由：____。